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冰凍切片包埋劑的包埋流程你真的了解嗎?

更新時間:2021-12-15   點擊次數:1079次
   冰凍切片包埋劑是一種聚乙二醇和聚乙烯醇的水溶性混合物,目前已廣泛用于免疫組化實驗室中,其用途是在冰凍切片時支撐組織,以增加組織的連續性,減少皺折及碎裂。又因OCT混合物為水溶性,故在漂片時可溶于水,所以在以后的染色中不會增加背景染色。
利用OCT混合物(opti-mumcuttingtemperaturecompound)預先浸潤組織,然后再進行恒冷箱切片,使切片質量得到改善。
  目前實驗室使用的冰凍切片包埋劑主流產品是日本櫻花公司的O.C.T.Compound,118ml/瓶,質量穩定,研究者比較熟習。
  在使用OCT進行包埋時,對于包埋模具而言,您可以選擇廠家已有的產品,也可以根據實際條件利用手邊已有的包埋管、包埋板等;也有心靈手巧的研究者自己利用銅版紙折疊出很漂亮實用的OCT包埋模具(當然前提是您的用量要少)。
  OCT包埋劑(SAKURA產品)包埋流程:
  1.將放在蔗糖溶液中的組織塊取出,放入20gL-1蔗糖與OCT包埋劑1:1體積比例混合液中,室溫浸
  泡2h
  2.移入OCT包埋劑中室溫浸泡4h,更換新的OCT包埋劑,室溫浸泡6h.
  3.將標本置于托物臺,用恒冷箱切片機切片(一般-22℃),片厚10μm,貼于預處理的載玻片上,-20℃冰箱保存。
  在實際工作中,有研究者發現當包埋的樣本體積較大或者冰凍溫度要求更低一點時,使用櫻花的Oct進行包埋往往很難取得理想的包埋結果。當您遇到這樣的麻煩時,我們建議您采用另外一種Oct包埋劑TissueFreezingMedium,美國TBS公司生產。
  如果該文對您的學習和研究能有絲毫幫助,我們都會備感欣慰。